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Título: Atividade anti-plasmodial do extrato hidroalcoólico de Libidibia ferrea mart. ex tul. var. ferrea
metadata.dc.creator: ASSIS, Francisco Flávio Vieira de
Palavras-chave: Malária;Jucá;Fitoterápicos;Amazônia;Saúde
Data do documento: 8-Ago-2022
Editor: Universidade Federal do Oeste do Pará
Citação: ASSIS, Francisco Flávio Vieira de. Atividade anti-plasmodial do extrato hidroalcoólico de Libidibia ferrea mart. ex tul. var. ferrea. Orientador: Antonio Humberto Hamad Minervino. 2022. 50 f.: il. Dissertação ((Mestrado) – Programa de Pós-Graduação em Biociências, Universidade Federal do Oeste do Pará, Santarém, 2022. Disponível em:https://repositorio.ufopa.edu.br/jspui/handle/123456789/1155
Abstract: Malaria is an infectious and parasitic disease that affects millions of people in the tropical and subtropical regions of the world. In Brazil, most cases are in the Legal Amazon, especially due to the favorable conditions for the existence of the vector. Malaria, a disease caused by protozoa of the genus Plasmodium, is the protozoan that kills most human beings in the world. The resistance described in Southeast Asia by Plasmodium falciparum, to artemisinin derivatives, a drug classically used to treat the disease, threatens malaria control, highlighting the need for the development of new drugs, especially natural products. Medicines from natural substances are able to treat about 80% of the diseases that affect humanity. Libidibia ferrea Mart. ex Tul. var. ferrea, is a tree that grows throughout Brazil, being found mainly in the North and Northeast regions, being commonly known as jucá. Jucá has been extensively investigated for its various biological properties (anti-inflammatory, analgesic, anticancer, antioxidant, antimicrobial and healing) but there are no studies on its action against Plasmodium parasites. In this context, the objective was to evaluate the in vitro anti-plasmodial activity of the hydroalcoholic extract of Jucá (L. ferrea) (EHJ). The preparation of the hydroalcoholic extract of Jucá was carried out using fruits, the fruits (1.5 kg) were sanitized with 70º Gl alcohol and dried at room temperature. After 48 hours, the fruits were placed in a forced air circulation oven at 40ºC for 72 hours. Subsequently, the fruits were crushed and placed for maceration in 96° Gl alcohol, in the proportion of 5 liters to 1 kg of fruit, for 7 days. Then, the macerate was filtered and the tincture was extracted using a rotary evaporator. For the cytotoxicity assay, the MTT method with WI- 26VA4 cells (ATCC CCL-75 lung fibroblast) was used. This test consists of the rapid colorimetric evaluation of the growth of cell lines in vitro. To obtain the intraerythrocyte phases of Plasmodium falciparum, parasites of the W2 strain (chloroquine-resistant) were cultured in human red blood cells in vitro under ideal conditions for growth. For the anti-plasmodial test, synchronized cultures of P. falciparum with 0.5% ring-stage parasitemia and 2% hematocrit were distributed in a 96-well plate (180μL per well). The tested compound was added (20μL) to the test plate, in triplicate, and in different serial concentrations from 50 to 0.20μg/mL. In the tests performed, cytotoxicity was recorded as the percentage of reduction in absorbance. The hydroalcoholic extract of Jucá did not show cytotoxic activity by MTT, with an IC50 value greater than 100 µg/ml. In the determination of IC50 by anti-plasmodial test, the value was 11.10 µg/ml. In addition, the selectivity index (SI) 9 was obtained, which corresponds to the relationship between the cytotoxic and anti-plasmodial activities of the hydroalcoholic extract of Jucá. The extract showed low hemolytic activity at the highest concentrations and did not show hemolytic activity at the lowest concentrations tested. Due to its anti-plasmodial activity at the concentrations tested and low toxicity, the Jucá extract is presented as a candidate for herbal medicine in the treatment of malaria, and may also potentiate its effect if associated with other herbal medicines.
Resumo: A malária é uma doença infecciosa e parasitária, que afeta milhões de pessoas nas regiões tropicais e subtropicais do mundo. No Brasil, a maioria dos casos estão na Amazônia Legal devido especialmente às condições favoráveis para a existência do vetor. A malária, doença causada por protozoários do gênero Plasmodium, é a protozoose que mais mata seres humanos no mundo. A resistência descrita no sudeste da Ásia do Plasmodium falciparum, à derivados de artemisina, droga classicamente utilizada no tratamento da doença, ameaça o controle da malária, ressaltando a necessidade do desenvolvimento de novos medicamentos, em especial os produtos naturais. Os medicamentos oriundos de substâncias naturais são capazes de tratar cerca de 80% das enfermidades que acometem a humanidade. Libidibia ferrea Mart. ex Tul. var. ferrea, é uma árvore que cresce em todo o Brasil, sendo encontrada, principalmente, na região Norte e Nordeste, sendo conhecida vulgarmente como jucá. O jucá, tem sido muito investigado por suas diversas propriedades biológicas (anti-inflamatória, analgésica, anticancerígena, antioxidante, antimicrobiana e cicatrizante) mas não existem estudos sobre sua ação contra parasitas do gênero Plasmodium. Neste contexto, objetivou-se avaliar a atividade anti-plasmodial in vitro do extrato hidroalcoólico de Jucá (L. ferrea) (EHJ). A preparação do extrato hidroalcoólico de Jucá foi realizada utilizando frutos, os frutos (1,5 kg) foram higienizados com álcool 70º Gl e secos em temperatura ambiente. Após 48 horas os frutos foram colocados em estufa de circulação de ar forçado microprocessada a 40ºC por 72h. Posteriormente, os frutos foram triturados e colocados para maceração em álcool 96° Gl, na proporção de 5 litros para 1 kg de fruto, durante 7 dias. Em seguida, o macerado foi filtrado e a tintura extraída por meio de rotaevaporador. Para o ensaio de citotoxicidade foi utilizado o método de MTT com células WI-26VA4 (fibroblasto pulmonar ATCC CCL-75). Este teste consiste na avaliação colorimétrica rápida do crescimento de linhagens celulares in vitro. Para obtenção das fases intraeritrocitárias de Plasmodium falciparum, os parasitos da cepa W2 (cloroquina-resistente) foram cultivados em hemácias humanas in vitro sob condições ideais para o crescimento. Para o teste anti-plasmodial as culturas sincronizadas do P. falciparum com 0,5% de parasitemia em estágio de anel e 2% de hematócrito foram distribuídas em placa de 96 poços (180μL por poço). O composto testado foi adicionado (20μL) à placa-teste, em triplicata, e em diferentes concentrações seriadas de 50 a 0,20μg/mL. Nos testes realizados, a citotoxicidade foi registrada como a porcentagem de redução na absorbância. O extrato hidroalcoólico de Jucá não apresentou atividade citotóxica por MTT, com valor de IC50 superior a 100 µg/ml. Na determinação do IC50 por teste anti-plasmodial o valor foi de 11,10 µg/ml. Além disso, obteve-se o índice de seletividade (IS) 9, que corresponde à relação entre as atividades citotóxicas e anti-plasmodial do extrato hidroalcoólico de Jucá. O extrato apresentou baixa atividade hemolítica nas maiores concentrações e não apresentou atividade hemolítica nas menores concentrações testadas. Devido a sua atividade anti-plasmodial nas concentrações testadas e baixa toxicidade, o extrato de Jucá apresenta-se como candidato a fitoterápico no tratamento de malária, podendo ainda potencializar seu efeito se associado com outros fitoterápicos.
URI: https://repositorio.ufopa.edu.br/jspui/handle/123456789/1155
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