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Título: Diversidade e perfil de resistência de cepas bacterianas heterotróficas isoladas de solo contaminado por rejeito de mandioca
metadata.dc.creator: FERREIRA, Andresa Krislany
Palavras-chave: Microrganismos do solo;Manipueira;Impactos ambientais;Antibiótico
Data do documento: 4-Jan-2023
Editor: Universidade Federal do Oeste do Pará
Citação: FERREIRA, Andresa Krislany. Diversidade e perfil de resistência de cepas bacterianas heterotróficas isoladas de solo contaminado por rejeito de mandioca. Orientadora: Graciene do Socorro Taveira Fernandes. 2023. 51 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Ciências Biológicas) - Universidade Federal do Oeste do Pará, Santarém, 2023. Disponível em: https://repositorio.ufopa.edu.br/jspui/handle/123456789/1708
Abstract: The production of cassava (Manihot esculenta Crantz) provides food by-products, such as cassava flour, for example, of great importance for the populations of the Brazilian Amazon. The liquid extracted from cassava pressing for the production of this by-product is called manipueira, which, when discarded irregularly, causes environmental damage due to the high level of toxicity and harmful compounds, such as hydrocyanic acid, negatively impacting the microorganisms present in the soil. The present work was divided into two chapters and aimed to evaluate the diversity and bacterial resistance present in the soil impacted with cassava. The soil used in this research was collected in an area located at the Universidade Federal do Oeste do Pará, Tapajós campus, which has the characteristics of being terra preta, and the place having a smaller flow of people circulating, although the presence of animals is constant. After collection, the soil was stored in two containers with a capacity of 20L, containing holes at its base, where it was poured until it reached the maximum capacity of the container, which were called treatment M1 and M2. It was then subjected to the residue of 5 liters of manipueira, which were poured so that the soil was soaked, and when it reached the bottom, it was filtered through the holes in the container. They were placed in an open place, exposed to the natural conditions of the environment, and the collection period is considered rainy in the region. 25 g samples from each container were collected every 15 days for a period of 45 days, submitted to serial dilution up to 10-5, from which 200 μl were removed and inoculated, in duplicate, in Plate Count Agar (PCA) using the spread plate technique to obtain bacterial growth. Afterwards, the Gram reading was performed for the morphological identification and purity of the isolates, the biochemical identification was performed with the aid of the Bergey key and selection of bacteria based on the resistance profile from the disk diffusion technique, which were submitted to tests for 11 antibiotics distributed between spectrums of action. It was observed in the first chapter that the diversity of bacteria in the M2 treatment prevailed in comparison to the M1 treatment, however through the statistical analysis the results were not significant. There was a prevalence of Gram positive bacteria of the genus Clostridium spp. in both treatments, and in the 4 collection times. It is noteworthy the presence of the genus Staphylococcus aureus only in treatment M1 and Bacillus spp. only in treatment M2. In the second chapter, Gram positive bacteria of the genus Clostridium spp. showed resistance to the antibiotic Oxacillin and Penicillin in the collections, while Gram negative bacteria of the genus Pseudomonas spp, Aeromonas spp. followed by the species Klebsiella peneumonie showed resistance to the antibiotic Ampicillin. The antibiotics with the highest resistance profile belong to the β-lactam class, capable of inhibiting the actions of bacteria that produce β-lactamases. As a result, the bacterial microbiota proved to be tolerant to the harmful compounds of manipueira, although other studies point to a problem regarding the contaminating residue. Resistant strains can be observed in the present work, which reflects on the ability of these bacteria to resist under extreme conditions, such as the case of soil contaminated by manipueira characterized by its toxic compounds.
Resumo: A produção da mandioca (Manihot esculenta Crantz) fornece subprodutos alimentícios, como a farinha de mandioca, por exemplo, de grande importância para as populações da Amazônia brasileira. O líquido extraído da prensagem da mandioca para a produção desse subproduto é chamado de manipueira, que quando descartado de forma irregular, causa prejuízos ambientais devido ao alto teor de toxidade e compostos nocivos, como o ácido cianídrico, impactando negativamente os microrganismos presentes no solo. O presente trabalho foi dividido em dois capítulos e teve como objetivo avaliar a diversidade e a resistência bacteriana presente no solo impactado com manipueira. O solo utilizado nesta pesquisa foi coletado em uma área localizada na Universidade Federal do Oeste do Pará, campus Tapa. Após a coleta o solo foi armazenado em dois recipientes com capacidade de 20L, contendo furos na sua base, e que foram denominados de tratamento M1 e M2. Em seguida, o tratamento M2 foi submetido ao resíduo de 5 litros da manipueira, e ao atingir o fundo, o mesmo foi filtrado pelos furos do recipiente. Os recipientes foram acondicionados em local aberto, expostos as condições naturais do ambiente. Amostras de 25 g de cada recipiente foram coletadas a cada 15 dias por um período de 45 dias, submetidas a diluições seriadas até a 10-5 da qual foram retirados 200 μl e inoculados, em duplicata, em meio de cultura Plate Count Ágar (PCA) utilizando a técnica spread plate. Após, realizou-se a leitura de Gram para a identificação morfológica e pureza dos isolados, a identificação bioquímica foi realizada com auxílio da chave de Bergey e seleção de bactérias com base no perfil de resistência a partir da técnica de difusão em disco as quais foram submetidas a testes para 11 antibióticos distribuídos entre espectros de ação. Observou-se no primeiro capítulo que a diversidade de bactérias no tratamento M2 prevaleceu em comparação ao tratamento M1, e através da análise estatística os resultados de diversidade não foram significados. Houve prevalência de bactérias Gram positivas do gênero Clostridium spp. nos dois tratamentos. Destaca-se a presença do gênero Staphylococcus aureus apenas no tratamento M1 e de Bacillus spp. apenas no tratamento M2. No segundo capítulo, bactérias Gram positivas do gênero Clostridium spp. apresentou resistência ao antibiótico Oxacilina e Penicilina nas coletas, enquanto Gram negativas dos gêneros Pseudomonas spp, Aeromonas spp. seguidos da espécie Klebsiella peneumonie apresentaram resistência para o antibiótico Ampicilina. Os antibióticos que apresentaram maior perfil de resistência são da classe dos β-lactâmicos, capazes de inibir as ações de bactérias produtoras de β- lactamases. Com isso, a microbiota bacteriana se mostrou tolerante aos compostos nocivos da manipueira, embora outros estudos apontem uma problemática acerca do resíduo contaminante. Cepas resistentes podem ser observadas no presente trabalho, o que reflete na capacidade dessas bactérias em resistir sob condições extremas, como o caso do solo contaminado pela manipueira caracterizada pelos seus compostos tóxicos.
URI: https://repositorio.ufopa.edu.br/jspui/handle/123456789/1708
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