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Título: Caracterização química e atividade biológica de compostos obtidos de actinobacté - rias isoladas de rochas carbonáticas na Amazônia
metadata.dc.creator: CHAVES, Karine Rodrigues do Nascimento
Palavras-chave: Streptomyces;Microbiodiversidade Amazônica;Potencial biotecnológico
Data do documento: 2-Abr-2024
Editor: Universidade Federal do Oeste do Pará
Citação: CHAVES, Karine Rodrigues do Nascimento. Caracterização química e atividade biológica de compostos obtidos de actinobacté - rias isoladas de rochas carbonáticas na Amazônia. Orientadora: Silvia Katrine Rabelo da Silva. 2024. 59 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde ) – Instituto de Saúde Coletiva, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, Universidade Federal do Oeste do Pará, Santarém, 2024. Disponível em: https://repositorio.ufopa.edu.br/jspui/handle/123456789/2139. Acesso em: .
Abstract: The carbonate rocks of the Itaituba Formation date back approximately 300 million years, preserving geological events and biogeochemical processes of degradation of organic matter, suggestive of the presence of actinobacteria with properties not yet documented. Therefore, the present study proposes to perform the bioprospecting of actinobacteria isolated from carbonate rocks in the Amazon. A total of 21 isolates, PML1 to PML21, were evaluated in the production of antimicrobial substances by agar diffusion against pathogens to identify promising isolates. Morphological and biochemical characterization took place following the International Streptomyces Project. From obtaining the extracts through the solvent ethyl acetate, the cytotoxic action of the human colorectal cancer cell line (HCT-116) and antioxidant activity of the most promising isolates was evaluated.dant substances of interest to the biotechnology industry.Next, the HPLC-DAD and CG-MS tests were performed. Morphologically, most isolates had white airy mycelium and yellow vegetative mycelium. Of the 21 actinobacteria isolated, 13 were active against at least one of the 11 pathogens tested, with a spectrum of action ranging from Gram-positive to Gram-negative bacteria. PML5 with a halo of 16 mm + 0.00 against Salmonella enteridis INCQS00268, PML11 with a halo of 27 mm + 0.00 against Micrococcus lutteus ATCC7468 and PML15 with a halo of 17 mm + 1.0 against Proteus vulgaris ATCC13315 and 17 mm + 0.00 against Aeromonas hydrophyla INQS00318. Regarding enzyme production, the promising isolates showed enzyme index for Lipase, Esterase, Caseinase and positivity for Catalase. The cytotoxic test showed the cytotoxic activity of PML5 with an inhibition of 96.5% of the cell growth of the human colorectal cancer cell line (HCT-116), being, therefore, the most promising isolate. The antioxidant action of PML5 was also verified by the capture of the free radical ABTS with an inhibition of 35.60%, and by the capture of the free radical DPPH with an action of 10.65%, at the tested concentration. The extract of the PML5 strain was analyzed by HPLC and showed the presence of four peaks, where there were similar absorbance patterns, indicating the possibility of the extract having metabolic pathways that synthesize substances of the same class. The CG-EM of the extract showed the presence of 10 volatile compounds. The main compound was Cyclododecane compared to other bioactive compounds. These results demonstrate the potential of Amazonian biodiversity, revealing the carbonate rock isolate PML5 as a producer of antimicrobial, cytotoxic and antioxidant substances of interest to the biotechnology industry.
Resumo: As rochas carbonáticas da Formação Itaituba datam aproximadamente 300 milhões de anos atrás, preservando eventos geológicos e processos biogeoquímicos de degradação de matéria orgânica, sugestiva para a presença de actinobactérias com propriedades ainda não documentadas. Portanto o presente estudo propõe-se a realizar a bioprospecção de actinobactérias isoladas de rochas carbonáticas na Amazônia. Foram avaliados 21 isolados, PML1 à PML21, na produção de substâncias antimicrobianas pela técnica de difusão em ágar contra patógenos para identificar os isolados promissores. A caracterização morfológica e bioquímica ocorreu seguindo o International Streptomyces Project. A partir da obtenção dos extratos através do solvente acetato de etila, foi avaliada a ação citotóxica linhagem de células de câncer colorretal humano (HCT-116) atividade e antioxidante dos isolados mais promissores. Em seguida, foi realizado os testes CLAE-DAD e CG-EM. Morfologicamente, a maioria dos isolados apresentou micélio aéreo branco e vegetativo amarelo. Das 21 actinobactérias isoladas, 13 foram ativas contra ao menos um dos 11 patógenos testados, com espectro de ação variando entre bactérias Gram positivas e Gram negativas. Houve destaque para PML5 com halo de 16 mm + 0,00 contra Salmonella enteridis INCQS00268, PML11 com halo de 27 mm + 0,00 contra Micrococcus lutteus ATCC7468 e PML15 com halo de 17 mm + 1,0 contra Proteus vulgaris ATCC13315 e 17 mm + 0,00 contra Aeromonas hydrophyla INQS00318. Com relação à produção enzimática, os isolados promissores apresentaram índice enzimático para Lipase, Esterase, Caseinase e positividade para Catalase. O teste citotóxico evidenciou a atividade citotóxica de PML5 com uma inibição de 96,5% do crescimento celular da linhagem de células de câncer colorretal humano (HCT-116), sendo, portanto, o isolado mais promissor. Foi constatado, também a ação antioxidante da PML5 pela captura do radical livre ABTS com uma inibição de 35,60%, e pela captura do radical livre DPPH com ação de 10,65%, na concentração testada. O extrato da linhagem PML5 foi analisado por CLAE mostrou a presença de quatro picos, onde houve padrões de absorbância semelhantes indicando a possibilidade do extrato possuir rotas metabólicas sintetizadoras de substâncias da mesma classe. O CG-EM do extrato mostrou a presença de 10 compostos voláteis. O principal composto foi o Ciclododecano em comparação com outros compostos bioativos. Esses resultados demonstram o potencial da biodiversidade amazônica, revelando o isolado de rocha carbonática PML5 como produtora de substâncias antimicrobianas, citotóxicas e antioxidante de interesse para a indústria biotecnológica.
URI: https://repositorio.ufopa.edu.br/jspui/handle/123456789/2139
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